Chiyo est souvent appelé Chiyo à l’ancienne par les villageois de Suna, est le spécialiste du poison et des marionnettes du village. Elle et son frère Ebizo sont très vénérés à Suna et sont connus sous le nom de frères et sœurs. Chiyo est très compétente lorsqu’il s’agit de gérer les poisons et d’utiliser souvent ses compétences pendant la troisième guerre secrète de Ninja, pour être contrée à plusieurs reprises par l’expertise médicale de Tsunade. Cela a amené Chiyo à avoir rancune contre Tsunade, qu’elle est venue appeler cette limace-girl, bien qu’elle soit impressionnée par ce que Sakura Haruno a appris d’elle.
Chiyo s'est occupé de son petit-fils, Sasori, pendant son enfance en raison de la mort de ses parents. Elle a rancune contre le village des feuilles cachées pour leur mort par le croc blanc du village des feuilles caché que Kakashi s'est révélé être son père. À un moment donné, elle a enseigné à Sasori comment utiliser la technique des marionnettes, et Sasori a utilisé ses nouvelles connaissances pour construire des marionnettes ressemblant à ses parents par les anciennes marionnettes défectueuses. Voulant que Sasori puisse ressentir l'amour de la part de ses parents de marionnettes, Chiyo a développé un jutsu qui lui permettrait de donner vie aux marionnettes au prix de ses propres. Avant qu'elle ne puisse utiliser cette capacité pour Sasori, cependant, il a quitté le village, laissant Chiyo avec le désir de revoir son petit-fils. En l'absence de Sasori, Chiyo a installé un bouclier de chakra dans son bras droit, se donnant une mesure défensive à utiliser dans des situations désespérées. Chiyo continuerait à sceller le Shukaku unilaté à l'intérieur de Gaara sous les ordres du quatrième Kazekage. Après cela, Chiyo et Ebizo se sont retirés des affaires de Suna et ont passé leur temps ensemble, où Chiyo jouerait des blagues sur son frère en prétendant qu'elle était morte juste pour lui faire peur. Elle fait de même pour Naruto dans un segment de récapitulatif sur la boutique Dango de Hidden Leaf Village. Lorsque Sasori revient à Suna des années plus tard et kidnappe Gaara, Chiyo rejoint l'équipe de récupération dans l'espoir de voir Sasori. Alors que Kakashi part avec Naruto pour poursuivre le partenaire de Sasori Deidara, Chiyo est obligé de combattre Sasori aux côtés de Sakura. En utilisant des lames d'attaque manipulantes pour utiliser des cordes de chakra pour manipuler les mouvements de Sasori et aider Sakura au combat, les deux sont capables de gagner le dessus sur Sasori. Lorsque Sasori fait ressortir 100 de ses propres marionnettes pour combattre les deux, Chiyo utilise les dix marionnettes de Monzaemon Chikamatsu pour combattre son armée de marionnettes. Alors que Sasori essaie un dernier effort pour vaincre Chiyo, Chiyo le poignarde à travers le cœur avec les marionnettes de ses parents, lui permettant d'être près d'eux dans la mort car il ne pouvait pas être dans la vie. Après avoir retrouvé le reste de l'équipe de récupération, Gaara est retrouvée morte. Naruto Uzumaki, en colère que Gaara est décédé à cause du Shukaku scellé en lui, se déchaîne à Chiyo pour son rôle en lui donnant ce sort. Dans une tentative de s'excuser pour ce qu'elle avait fait, Chiyo essaie de raviver Gaara. Bien qu'elle soit initialement incapable de le faire en raison d'être trop faible, Naruto fait don de certains de son chakra pour aider à terminer le processus. Avec le renouveau de Gaara, Chiyo offre ses bénédictions à Naruto comme le prochain Hokage, et meurt paisiblement avec sa vision du monde changé à la fin grâce à Naruto et Sakura.
